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| 電化學(xué)用于凝血酶檢測(cè)23在這些配置中 | |||
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許多不同的在電化學(xué)aptasensors已用于凝血酶檢測(cè)23在這些配置中，凝血酶檢測(cè)到使用的夾層格式。夾心法格式是僅適用于具有多個(gè)適配體結(jié)合區(qū)域的情況下的目標(biāo)。凝血酶有兩個(gè)的正電性exosites，這兩者都能夠結(jié)合特定的適配體。
夾心法進(jìn)行固定金電極上的自組裝單層硫醇化的適體。隨后孵育電極與凝血酶。在第二次溫育步驟，辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的適配體被允許綁定到其他的凝血酶外部位。HRP標(biāo)記的適配體，制備生物素標(biāo)記的適配體與鏈霉親和素-HRP孵育，有效地形成的過氧化物酶標(biāo)記的適配體。的HRP，從而固定在電極表面上，使用過氧化氫 ??和擴(kuò)散，鋨的基于介體（輸出端（聯(lián)吡啶）2（吡咯-CH 2 -NH 2）] Cl）的電化學(xué)測(cè)定。在電極上測(cè)得的電流相關(guān)的凝血酶通過校準(zhǔn)的數(shù)量（參見圖3）。
適體的凝血酶適體相互作用的優(yōu)化配置產(chǎn)生的電流為4.5μA。陰性對(duì)照驗(yàn)證該信號(hào)不是由于非特異性吸附。陰性對(duì)照，無凝血酶固定在電極表面上，導(dǎo)致在電流為1.8μA。第二個(gè)陰性對(duì)照，無底座的適體，產(chǎn)生一個(gè)相同的電流。第三個(gè)陰性對(duì)照，未經(jīng)HRP標(biāo)記的適配體，導(dǎo)致0.2μA的電流（參見圖4）。
報(bào)道的電化學(xué)響應(yīng)電流差在-0.1 V（對(duì)銀和氯化銀）之前和之后加入6 mM的過氧化氫和鋨的氧化還原介體。擔(dān)任過氧化氫的HRP的底物的標(biāo)簽，以及允許鋨氧化還原介體的酶的轉(zhuǎn)導(dǎo)成可測(cè)量的電流響應(yīng)的營(yíng)業(yè)額。
雖然這個(gè)實(shí)驗(yàn)中遭受顯著的非特異性吸附的HRP標(biāo)記的適配體，該系統(tǒng)的檢測(cè)極限為92納米（參見圖5）。檢出限為測(cè)量通過沿著線性回歸直線的線性響應(yīng)的的電流抗凝血酶值擬合。線的標(biāo)準(zhǔn)偏差的測(cè)定和乘以3的假?zèng)]有檢測(cè)的概率降低至5％。添加該值的信號(hào)的值是區(qū)別于噪聲響應(yīng)。
其結(jié)果是過氧化物酶標(biāo)簽，電化學(xué)檢測(cè)顯示出顯著的背景響應(yīng)（參見圖4和圖5）。過氧化物酶標(biāo)簽表現(xiàn)出強(qiáng)烈的非特異性吸附的電化學(xué)傳感器。其他的電化學(xué)親和傳感器，使用過氧化物酶已觀察到這種效應(yīng)。過氧化物酶的電化學(xué)檢測(cè)是非常敏感的，并沒有得到充分的必要條件，以防止在過氧化物酶結(jié)合到電極表面。
結(jié)論牢固結(jié)合和具體的目標(biāo)以外的明顯的互補(bǔ)序列的寡核苷酸序列的能力允許基于寡核苷酸的檢測(cè)策略將用于在新的領(lǐng)域，如治療學(xué)，分離技術(shù)和生物傳感器。適體的檢測(cè)策略中的應(yīng)用是特別有前途的。
適體提供有效身份證件和生產(chǎn)方法（例如，SELEX）??，簡(jiǎn)單的化學(xué)合成（例如，自動(dòng)合成直接分析支持），固定在高密度，檢測(cè)所有毒素的可能性，并在非生理?xiàng)l件下的穩(wěn)定性。事實(shí)上，適體可能取代在生物傳感器應(yīng)用中??的抗體。然而，首先需要匹配的抗體庫，適體生物傳感器。其次，許多現(xiàn)成的開發(fā)，優(yōu)化和解決這些實(shí)驗(yàn)的方法將需要?jiǎng)?chuàng)建適配子之前將很容易通過。
參考文獻(xiàn)
1。?氣賀等人，“適體mRNA的模式具有鮮明的黃嘌呤/鳥嘌呤堿基的嘌呤識(shí)別，” 核酸研究 26（1998）：1755年至1760年。
2。中號(hào)Sassanfar JW紹斯塔克，“RNA結(jié)構(gòu)結(jié)合ATP，” 自然 364（1993）：550-553。
3。LR Paborsky等人，“人凝血酶的單鏈DNA核酸適體結(jié)合位點(diǎn)，” 中國(guó)生物化學(xué) 268（1993）：808-811。
4。RD JENISON等，“高分辨率RNA分子的歧視，” 科學(xué)“ 263（1994）：1425年至1434年。
5。慧聰Goicoechea AC Olivieri的，和A穆尼奧斯，人血清中茶堿的測(cè)定紫外分光光度法和偏最小二乘（PLS-1）校準(zhǔn)“，” 分析化學(xué)物理學(xué) 384（1999）：95-103。
6。DL羅伯遜和GF喬伊斯“評(píng)選，專門切割單鏈DNA的RNA酶在體外，” 自然“ 344（1990）：467-468。
7。S阿格拉瓦爾，C赫里斯托祖，和M的步態(tài)，“高效的方法將非放射性的標(biāo)簽，以合成的寡脫氧核糖核苷酸的5'末端，” 核酸研究 14（1986）：6227-6245。
8。?比澤克等，“推導(dǎo)RNA適體抑制劑的人補(bǔ)體C5，” 免疫藥理學(xué) 42（1999）：219-230。
9。Q鄧等人，“保留和親和層析法分離腺苷及類似物與核酸適體的固定相，” 分析化學(xué) 73（2001）：5415-5420。
10。RB Kotia李，L，LB McGown，“非目標(biāo)化合物的分離DNA核酸適體，” 分析化學(xué) 72（2000）：827-832。
11。KA戴維斯等人，“使用流式細(xì)胞儀的高親和力DNA配體，” 核酸研究 24（1996）：702-706。
12。?康拉德和AD埃林頓，“固定化的蛋白激酶C同工酶檢測(cè)RNA適配子，” 分析生物化學(xué) 242（1996）：261-265。
13。，L DW Drolet以月亮麥克德莫特，和TS羅米格的，“酶聯(lián)寡核苷酸的含量，” 自然生物技術(shù) 14，沒有。8（1996）：一○二一年至一零二七年。
14。F Kleinjung等人，“高親和RNA作為識(shí)別元素在生物傳感器，” 分析化學(xué) 70（1998）：328-331。
15。N濱口，A埃林頓，和M斯坦頓，“直接檢測(cè)蛋白質(zhì)，核酸適體的燈塔” 分析生物化學(xué)， 294（2001）：126-131。
16。CA Savran等人，“使用基于適體的受體分子蛋白的微機(jī)械的檢測(cè)”，分析生物化學(xué)（Analytical Biochemistry） 76（2004）：3194-3198。
17。?江等人，“具體的適體的蛋白質(zhì)相互作用研究的原子力顯微鏡，” 分析化學(xué) 75（2003）：2112-2116。
18。MD Schlensog等，“愛波生物傳感器使用核酸為配體，傳感器和執(zhí)行器，B：化學(xué) 101（2004）：308-315。
19。K表池袋，C清原和K SODE的的，“新型電化學(xué)傳感器系統(tǒng)的蛋白質(zhì)，使用適配三明治的方式，” 生物傳感器與生物電子學(xué) 20（2005）：2168年至2172年。
20。?許等人免費(fèi)“的標(biāo)簽，基于核酸適體陣列檢測(cè)，電化學(xué)檢測(cè)” 分析化學(xué) 77（2005）：5107-5113。
21。AE拉迪等，“試劑，可重復(fù)使用，超靈敏的電化學(xué)分子燈塔Aptasensor的，” 中國(guó)的美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì) 128（2006）：117-124。
22。BR貝克等人，“電子，基于核酸適配體的小分子傳感器的快速，無標(biāo)記檢測(cè)可卡因摻假樣品和生物體液，” 中國(guó)的美國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì) 128（2006）：3138-3139。
23。中號(hào)米爾，M Vreeke，我的Katakis，“開發(fā)電化學(xué)凝血酶Aptasensor的不同的策略。” 電化學(xué)通訊（2006）：505-511。
24。中號(hào)利斯等，“一種基于核酸適配體的石英晶體蛋白質(zhì)生物傳感器”，分析化學(xué) 74（2002）：4488-4495。
25。JA Hansen等人，“Quantum-Dot/Aptamer-Based超靈敏多分析物的電化學(xué)生物傳感器中，” [美國(guó)化學(xué)會(huì)志 128（2006）：2228至29年。
26。?Tombelli等，“基于核酸適體生物傳感器檢測(cè)HIV-1 TAT蛋白” 生物電化學(xué) 67（2005）：135-141。
27。RA Potyrailo等，“適應(yīng)選擇核酸配體適體生物傳感器，” 分析化學(xué) 70（1998）：3419-3425。
28。?弗雷迪克森等人，“使用接近的依賴DNA連接檢測(cè)蛋白檢測(cè)，” 自然生物技術(shù) 20（2002）：473-477。
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