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| 兔單克隆抗體結合的單克隆抗體的最佳屬性 | |||
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1995年,凱瑟琳騎士和她的同事在芝加哥羅耀拉大學開發出一種漿細胞瘤細胞系,稱為240 e 1,從雙轉基因兔的癌基因過度表達v abl和發現。 240 e 1細胞融合與兔淋巴細胞分泌產生的hybridomas兔單克隆抗體。 8 然而,240年的穩定hybridomas e 1派生。令人擔憂 由此產生的hybridomas沒有基因穩定和抗體活動往往是多個通道細胞后丟失。 1996年,朱镕基和羅伯特Pytela維銘,那么大學的
加利福尼亞,舊金山,提出最大努力改善240 e 1和開發更好的融合伙伴細胞株,240年北高,效率和可靠穩定的融合雜種細胞。 一個數量的特征,區分240北從母公司240 e 1被觀察到。 9 這個新的融合伙伴細胞株使得兔子雜交瘤細胞生產常規實驗室技術,使大規模開發的兔子單克隆抗體成為現實。 類似于原始鼠標融合伙伴細胞株,240北細胞株繼承了不良性狀連鎖的內源性免疫球蛋白g。 8 為了解決這個問題,維銘朱和他的同事們開發出了新的Epitomics衍生行240北,稱為240 e w2,不攜帶一個內生重鏈基因和240 e w3,既缺乏內生重和輕鏈基因。 表我總結了特征不同的兔子融合伙伴細胞系。
兔子雜種細胞生成過程類似于鼠標hybridomas(圖2)。到目前為止,與新的融合伙伴細胞株(240 e w2和240 e w3),成千上萬的雜種細胞細胞株已經生成好了生命科學、診斷和治療的應用程序。 其中,幾千研究試劑和超過150,5免疫組織化學(IHC)產品已用于市場,和三個兔單克隆抗體(RabMAb)已被FDA批準作為二類、三類3,5產品。 Epitomics已經開發了一種人性化的RabMAb候選藥物,這是證明有更好的體外和體內的功效比商業基準。 10 這種藥物是目前臨床試驗的候選人。
高靈敏度和特異性。 通常,RabMAbs有10到100倍比鼠單克隆抗體親和力。 我們最近為1000 Kd測量數據RabMAbs(沒有顯示)已經證實這。 相同或相似的抗原有時可能會發現在看似無關的分子。 因此,針對一個抗原抗體反應的可能
兔子雜種細胞生成過程。 B細胞被孤立在一只兔子,是免疫的免疫原,融合一只兔子融合伙伴細胞系生成hybridomas。 從hybridomas抗體篩選是使用各種化驗。 選擇雜種細胞克隆是subcloned確保他們是單克隆。 最后的克隆是短襪生產更大數量的rabMAbs在CELLine Integra瓶,或雜種細胞免疫球蛋白g基因克隆和重組抗體產生一個哺乳動物表達系統。
與一個不相關的抗原意外。 因此,特異性的抗體是極其重要的,以避免假陽性或信噪比問題診斷。 兔同更大的抗體和抗體篩查曲目嚴格,一個非常具體的RabMAb可以發展,已經在IHC診斷應用程序所有胰臟癌病人。 鼠單克隆抗體相比,相同的目標,RabMAbs檢測與較高的敏感性和特異性,給清潔染色模式較低或沒有背景在石蠟包埋組織。 11 此外,每個免疫兔脾包含高達50倍比一只老鼠脾臟淋巴細胞。 兔子淋巴結、骨髓、淋巴器官和其他也提供了許多來源的B細胞產生較大的雜種細胞池選擇更高的親和力和特定的雜交瘤細胞克隆。 有各種各樣的技術來提高檢測靈敏度的分析;然而,信噪比(特異性)通常不會提高。 我們相信一個更好質量的抗體是最好的解決方案來解決問題的雙重敏感性和特異性。
抗原決定部位識別小說。 兔抗體識別抗原已被證明不被鼠抗體。 這種現象可能是由于降低了immunodominance在兔子,它允許識別低豐富蛋白質或抗原通常是不可見的老鼠的免疫系統。 9 它也表明,兔子有較高的成功率比小鼠抗體生成這些小的抗原,如蛋白質改性或解理網站,或構象抗原。 能力開發兔單克隆抗體抗原小說提供了一個新的機會,因為很多疾病immunodiagnostics目標在低豐度或形成復合物與其他蛋白質。 RabMAb雌激素受體(ER)、sp 1克隆,FDA批準的抗體為病理評估預后和治療的乳腺癌,就是這樣一個例子。 因為小說的表位被這個抗體的敏感性和特異性的病理評價都顯著提高。 12 另一個例子是,RabMAb ERG、克隆EP110或EPR3864一致,這表明精致ERG蛋白表達和基因重組的存在在前列腺癌ERG因為能夠識別一個罕見的表位。 13
容易識別的小分子或半抗原。 這是觀察到兔子開發小分子抗體更容易比老鼠的nonpeptidic抗原決定部位呈現機制提供了一種解釋前面描述的可能。
小分子如藥物、類固醇激素,脂質或糖脂,食物或環境污染物與分子量小于1負責太小要適當處理和呈現給免疫系統。 因此,他們不是免疫原性。 然而,如果小分子化學與一個大的蛋白質分子,一個特定的抗體對小分子或化學組可以生成的。 研究表明,任何變更在形狀、大小或電荷的半抗原的變化能夠綁定到抗體,因此,必須要有一個大型多元化抗體結合綜合nonpeptidic曲目表位把分子為基礎開發高質量的抗體,這些半抗原。 顯然,兔子免疫系統被開發來滿足這一目的。 大量的表面抗原從致病微生物的碳水化合物,脂類,或糖脂。 看似,兔子擁有適當的免疫系統抗擊這些微生物和能夠產生高質量的抗體對試管的應用程序。
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