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| 膜所起作用的分析必須考慮膜分析分為兩大類 | |||
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在選擇一個特定的免疫系統硝化纖維膜,膜所起作用的分析必須考慮。 膜分析分為兩大類。 歷史上,第一個這樣的化驗流過過濾分析(圖2)。在這種類型的分析,定義了一個immunoreactant固定化到膜表面區域。 然后該膜覆蓋在一個吸水層,作為儲層通過設備泵樣本容量。 固定后,膜上的蛋白質鏈接網站的其余部分被非特異性相互作用降到最低。 試驗時使用,包含分析物的樣本添加到膜通過矩陣和過濾器,使分析物結合固定化抗體。 在第二步中,標記的第二抗體(一個抗體酶共軛,耦合到一個彩色乳膠粒子,或抗體納入彩色膠體)添加能夠與捕獲分析物完成三明治。 另外,二級抗體可以與樣品混合,添加在一個單一的步驟。 如果存在分析物,彩色點發展膜的表面上。 這種類型的分析的優點是簡單在制造和使用。
膜的選擇這樣一個分析取決于幾個因素,如的敏感性分析,運行試驗,所需的時間和讀出的類型受雇于化驗。 膜的孔隙大小的關鍵因素。 硝化纖維膜孔隙大小從0.2到8?m一直用于材料化驗。 孔徑越大,表面越低,因此,降低蛋白質鏈接能力。 但是因為毛孔大的膜支持更快速過濾率,他們可以產生更快的分析。 相反,smaller-pore膜可以創建一個更加敏感的測定。
標記抗體復雜的大小也決定了孔隙大小,必須大到足以允許未反應的抗體通過。 化驗使用抗體耦合到一個彩色乳膠珠需要一個更大的孔隙大小。
最近,lateral-flow免疫系統已經發展到允許單步分析,只需要添加一個示例(圖3)。在這些分析中,樣品被添加到設備和流動的一端通過毛細管作用的間隙空間材料的設備。 同時繼續沿著這流路徑,示例聯系人干試劑,通常標記的第二抗體,然后遷移與分析物的捕獲帶膜固定化抗體。 未反應的標記抗體繼續流過去這捕獲區,通常end-of-assay指示器。 一般來說,吸收劑材料末端的這些設備通過設備幫助繪制樣品。
膜在這些類型的系統必須提供不同的性能比最好的使用主要材料設備。 毛細管率成為更重要的屬性,因為它不僅規定運行試驗所需的總時間也決定了住宅或反應時間在任何給定的區域。
要滿足這些需求,硝化纖維膜與較大的孔隙大小,12?m,已經開發出來。 隨著孔隙大小的增加,毛細作用或毛細上升的速度通過矩陣增加(圖4)。然而,毛細作用速度和距離之間的關系不是線性的(圖5),因此反應時間在任何時候沿著膜可能會有所不同。 即使有一個相當大的綁定能力下降large-pore-size硝化纖維膜,它保留足夠的能力支持所有免疫測定(圖6)。
孔隙大小并不是唯一的因素,會影響毛細管率。 大多數硝化纖維膜含有表面活性劑潤濕援助,作為抗靜電劑。 的數量和類型表面活性劑包括在膜可以改變賦予不同的毛細管率與等效膜孔隙大小(圖7)。
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