細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒
在研究細胞時經(jīng)常要研究細胞的不同組份，而研究得最多的兩個細胞組份就是細胞核和細胞漿。分離細胞核蛋白和細胞漿蛋白，不僅可以用于研究蛋白在細胞內(nèi)的定位，而且很多時候分離出來的核蛋白可以用于轉(zhuǎn)錄調(diào)控方面的研究，例如EMSA(也稱gel shift)，footprinting等。
細胞核蛋白與細胞漿蛋白抽提試劑盒(Nuclear and Cytoplasmic Protein Extraction Kit)提供了一種比較簡單、方便的從培養(yǎng)細胞或新鮮組織中抽提細胞核蛋白與細胞漿蛋白的方法。約90分鐘就可以完成培養(yǎng)細胞的細胞核蛋白與細胞漿蛋白的分離。抽提得到的蛋白可以用于Western，EMSA，footprinting，報告基因檢測以及酶活力測定等后續(xù)操作。
本試劑盒是通過細胞漿蛋白抽提試劑A和B，在低滲透壓條件下，使細胞充分膨脹，然后破壞細胞膜，釋放出細胞漿蛋白，然后通過離心得到細胞核沉淀。最后通過高鹽的細胞核蛋白抽提試劑抽提得到細胞核蛋白。
本試劑盒可以抽提100個樣品，如果每個樣品的數(shù)量為約二百萬細胞或約30-50毫克組織。
保存條件：
-20℃保存，一年有效。
注意事項：
需自備PMSF。PMSF一定要在抽提試劑加入到樣品中前2-3分鐘內(nèi)加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。PMSF(ST506)可以向北京萊耀訂購。
抽提蛋白的所有步驟都需在冰上或4℃進行。
本試劑盒對于組織樣品，僅適合于新鮮組織，對凍存過的組織抽提效果很差。可以抽提的組織樣品數(shù)通常不足100個。
使用本試劑盒抽提到的細胞核蛋白與細胞漿蛋白均可直接用北京萊耀生產(chǎn)的BCA蛋白濃度測定試劑盒(P0009/P0010/P0010S/P0011/P0012/P0012S)測定蛋白濃度。但不適合用Bradford法測定蛋白濃度。
為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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