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研究研發(fā)的腸道病原菌快速診斷納米生物傳感器 | |||
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每個(gè)人都生活在這種危險(xiǎn)中,腸道病原菌引起的食源性疾病迸發(fā)事件時(shí)有發(fā)生。這無疑已成為日益嚴(yán)重的世界性公共衛(wèi)生問題。但目前腸道病原菌的實(shí)驗(yàn)室診斷仍以培養(yǎng)檢出病原菌為主要依據(jù),最快也要四到八天才能作出最終檢驗(yàn)診斷。而近年來,國內(nèi)外學(xué)者針對腸道病原菌的快速檢測技術(shù)展開了大量研究工作,但仍面臨需要專門技術(shù)人員操作、所用的試劑和儀器高貴和結(jié)果假陽性高等諸多問題。所以,不管激進(jìn)培養(yǎng)方法還是PCR等快速檢測方法都還難以滿足腸道病原菌的快速診斷和污染源的快速確定,需要尋找更好的方法。本研究結(jié)合納米技術(shù),并對已有的主要腸道病原菌特異適配體或寡肽序列進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì),將截短后的適配體或怪胎通過酰胺化反應(yīng)修飾到聚丁二炔納米囊泡的外表,實(shí)現(xiàn)生物傳感器的組裝。
利用適配體或寡肽等功能分子與腸道病原菌菌體外表脂多糖間的特異性結(jié)合和結(jié)合后引起聚丁二炔納米生物傳感器的顏色變化、比色響應(yīng)值改變或熒光值改變來定性或定量檢測標(biāo)本中的腸道病原菌,完成腸出血性大腸埃希菌O157H7比色檢測試劑、腸致病性大腸埃希菌O111比色檢測試劑、鼠傷寒沙門菌比色檢測試劑和沙門菌熒光檢測試劑。本研究研發(fā)的腸道病原菌快速診斷納米生物傳感器,不需要特殊儀器,具有操作簡便、檢測時(shí)間短,靈敏度較高和特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn),臨床上用于檢測腸道病原菌時(shí)既可實(shí)現(xiàn)快速檢測、又可降低成本,從而為推廣到臨床提供了可能。且僅需更換系統(tǒng)中的適配體或寡肽就可以應(yīng)用于其他病原菌的檢測,臨床檢驗(yàn)診斷,特別是病原菌檢測中具有廣闊的前景。此外,勝利構(gòu)建上轉(zhuǎn)換熒光多光譜影像系統(tǒng)進(jìn)行微生物檢測,結(jié)合磁性分離系統(tǒng),通過免疫磁性分離可以將所要檢測的病原微生物富集進(jìn)去,結(jié)合上轉(zhuǎn)換熒光納米探針,通過夾心的方式形成大量交聯(lián)并分離出來,利用上轉(zhuǎn)換熒光光學(xué)傳感系統(tǒng)進(jìn)行檢測。
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