購買時請注意選擇相應的產品名稱
| 聚乙二醇化重組人生長激素延長作用時間的藥物 | |||
|---|---|---|---|
|
聚乙二醇化重組人生長激素（PEG-rhGH）雖然是建立在rhGH上的以延長體內作用時間為目的的藥物，但是由于PEG的引入，使得改構后蛋白質在理化性質、體內體外活性上的復雜程度，都遠遠超出rhGH。重組人生長激素(Recombinant human growth hormone, rhGH)是由大腸桿菌或酵母菌表達的一種重要的非糖基化蛋白質激素，由191個氨基酸殘基組成，相對分子量為22,125，等電點為5.2。臨床上，rhGH主要用于治療因內源性hGH缺乏而導致的兒童侏儒癥、成人生長激素缺乏癥等[1]。由于其體內半衰期僅為0.5~2hr左右，故需要每天、長期注射才能發揮療效，治療周期往往為一年以上[2]。聚乙二醇（Polyethylene glycols, PEG）www.koudaiping.cn是一種毒性極低的線性大分子聚合物，具有水溶性和免疫惰性。蛋白類藥物經PEG修飾后，可延長半衰期，增加穩定性，同時降低免疫原性和抗原性[3]。2008年，第一個N端被枝杈型PEG修飾的rhGH進入臨床試驗[4]。雖然未發現嚴重不良反應且無抗PEG-rhGH的特異抗體產生，該產品卻因為在二期臨床試驗中觀察到注射部位出現皮下脂肪萎縮而被終止臨床研究。目前，國內已有3家企業申報了3種PEG-rhGH注射液，其中一家企業已取得了臨床批件。
雖然PEG-rhGH是在已收載于中國藥典2010年版的比較成熟的重組人生長激素基礎上進行研發的，但是，其質量標準中各項目及限度的制定不應簡單地照搬rhGH的標準，還應結合其自身獨特的理化結構性質及生物學活性，著重考慮PEG有關的質控項目。
1996年，美國Genentech公司的Clark等人利用分子量為5kDa的聚乙二醇（PEG），對重組人生長激素進行了長效改構研究[5]。研究結果表明，偶聯后的重組人生長激素隨著PEG偶聯數目的增多，其體內半衰期也相應延長，但其與受體結合的活性及體內刺激大鼠脛骨增殖的活性卻隨著偶聯數目的增加而急劇下降。本文由對照品網整理提供同時，rhGH上可發生PEG修飾的10個位點中，有4個位點處于rhGH與受體的結合部位，直接影響著rhGH的活性。因此，每個rhGH分子究竟結合了幾個PEG？這些PEG究竟結合在rhGH的哪些位點上？與這兩個問題密切相關的兩個指標——PEG對rhGH的平均修飾率與PEG在rhGH上的修飾位點就成為該類產品的重要質控指標與質控難點。
目前尚無國外產品的質量標準可供參考，國內企業與此相關的質控技術還有待于進一步完善。本文即從這兩個質控關鍵技術進行討論，并對質量標準制定中一些需重點關注之處進行說明。
目前，PEG修飾蛋白的質量標準中平均修飾率的檢測方法主要有：三硝基苯磺酸（TNBS）法、熒光胺法、質譜法、液相-示差/蒸發光檢測器聯用法等。其中，前兩種為間接測定法，要求對修飾前后的蛋白質準確定量。該類方法屬普通的化學與熒光發光法，操作相對簡單；后兩種屬于直接測定法，雖然結果較為準確，但所用儀器較為特殊或昂貴。因此，建立質量標準時，應考慮采用直接法獲得較為可靠的平均修飾率數值，隨后建立三硝基苯磺酸（TNBS）法或熒光胺法而納入標準。同時，如能成功建立直接法中的“液相-示差/蒸發光檢測器聯用法”，不僅可以準確控制單位點或多位點修飾的PEG-rhGH的平均修飾率，還可以同時進行游離PEG測定，以及PEG的定性鑒別。本文由對照品網整理提供如涉及文章版權問題請聯系作者刪除，文章轉載請注明地址：www.koudaiping.cn
|
| 上一篇：雜質研究及控制是藥品質量控制的核心 | 下一篇：質譜法熒光胺法兩種方法進行準確測定的前提條 |
|---|
無法在這個位置找到： xy/left.htm
2013-2019@ 河南尋夢電子商務有限公司版權所有
豫ICP備17046142號-2