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| 實驗室試管測試來檢測感染西尼羅河病毒 | |||
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從最初的西尼羅河病毒疫情在紐約市,制造商已經開發出各種實驗室試管測試來檢測感染西尼羅河病毒。 大多數的這些測試是基于檢測免疫球蛋白(即要么。 ,IgM,血液中免疫球蛋白g)或脊髓液,是因感染產生的,或病毒核酸片段在血液中通過使用核酸擴增技術。
其他西尼羅河病毒測試包括凝集抑制實驗(嗨)測試和蝕斑減少中和試驗(PRNT)。 嗨測試測量的最高稀釋血清,抑制血凝試驗(HI效價)的紅細胞通過添加病毒特定的抗體在測試血清。 PRNT措施存在特定的中和抗體(IgM和免疫球蛋白g)在測試血清當他們被添加到日益增長的病毒文化。 這個測試是進行生物安全三級設施和用于確認推定ELISA結果的積極。 但這些測試的進行都是耗時的。
雖然用于篩選血液銀行樣本,核酸擴增試驗(NAAT)方法不容易適用于臨床診斷感染西尼羅河病毒。 雖然該方法具體檢測急性感染病毒血癥期間,少量的病毒核酸存在于血液可能沒有在臨床上重要或敏感的西尼羅河病毒在發展自疾病可能解決本身在許多情況下。 然而,輸血的血液感染西尼羅河病毒在免疫功能低下的患者可能會產生嚴重后果。 西尼羅河病毒的方法檢測NAAT收到間隙在美國和加拿大,是商業上可用來檢測所有病毒的存在在日本腦炎serocomplex。
檢測IgM的存在和免疫球蛋白g超過一定濃度閾值似乎是最有效的工具,西尼羅河病毒感染診斷。 通常,患者感染西尼羅河病毒檢測出含有大量的西尼羅河病毒特定血清IgM的postinfection第八天,而西尼羅河病毒特定的血清免疫球蛋白g是由三個星期postinfection檢測。 病毒本身通常不能被檢測到當西尼羅河病毒特定血清IgM出現,雖然兩個IgM和免疫球蛋白g可能保持超過一年。 基于這一事實,美國疾病控制與預防中心開發了一個免疫球蛋白M抗體捕獲ELISA(mac ELISA)作為一個敏感的早期標志西尼羅河病毒感染和一個相應的免疫球蛋白g使用單克隆抗體的ELISA抗原捕獲車輛。 3、4 許多公共衛生實驗室采用這些測試來診斷西尼羅河病毒抗體在血液和脊髓液。
Panbio有限公司(澳大利亞昆士蘭)開發的第一個商業間接熒光抗體試驗,結果與CDC提供mac elisa通過使用西尼羅河病毒重組蛋白E抗原。 一個數量的IgM——和基于免疫球蛋白產生的ELISA檢測也專注技術有限公司(柏樹,CA),InBios國際有限公司(西雅圖),并通過使用信封Panbio重組蛋白E或西尼羅河病毒滅活的凈化作為抗原(NY 99應變)。 這些測試已通過FDA和健康加拿大,是商業上可用。
其他西尼羅河病毒測試包括ELISA格式結合使用一個純化重組信封和非結構化的西尼羅河病毒作為抗原蛋白5提高特異性。 另一個試驗是一種熒光微球免疫分析格式,夫婦一個rWNV-E聚苯乙烯微球,可以抗原提供了依據,同時測量多路微球免疫測定抗體活性重組抗原與幾個黃。 5、6 研究描述了雙微球免疫分析檢測的反西尼羅河病毒和反圣。 路易腦炎病毒,這幾個選擇性抗體微球。 7
之前,所有的西尼羅河病毒測試呈陽性或免疫球蛋白g市場主要是基于elisa設備(如。 、專注技術的西尼羅河病毒捕獲ELISA,Panbio IgM的西尼羅河病毒捕獲ELISA IgM)。 這些檢測是多步程序,要求儀表讀取測試,需要后續計算得到索引值解釋測試結果,并以6 - 10小時完成。 光譜診斷公司。(多倫多)最近發達RapidWN,快速檢測試紙條基于格式IgM測定產生結果的西尼羅河病毒在不到30分鐘,大體上是相當于不僅CDC mac elisa但也關注”和Panbio ELISAs IgM的捕捉。 RapidWN已通過FDA許可、加拿大衛生部。 與其他基于elisa設備,使用血清標本,RapidWN測試可以執行兩血清和血漿樣品。
在所有商業上可用IgM捕捉設備,因為他們不區分過去和當前的西尼羅河病毒感染,額外的免疫球蛋白g活動性也需要測試。 貪欲是通常估計基于能力的免疫球蛋白g來分離培養后的抗原與尿素溶液。 存在兩個IgM和低熱望在病人血清免疫球蛋白g表示最近的感染。 隨著感染的進行,新生成的高親和力抗體免疫球蛋白顯示病毒抗原,免疫球蛋白g活動性增加。 高免疫球蛋白g的存在揭示了先前感染活動性。
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