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常用標(biāo)記的檢測抗體的免疫分析標(biāo)準(zhǔn)的分析物與
      
  經(jīng)常使用的標(biāo)簽是堿性磷酸酶或辣根過氧化物酶(HRP),熒光染料,放射性同位素,免疫-PCR,DNA酶,很多時候。不幸的是,即使這些標(biāo)簽可能會導(dǎo)致干擾。分析通常標(biāo)志著探測器抗體或,對于競爭分析,標(biāo)準(zhǔn)的分析物與一個標(biāo)簽。不幸的是,即使這些標(biāo)簽會產(chǎn)生干擾。
  例如,熒光染料用于標(biāo)記是疏水性的,從而可以改變抗體的結(jié)合特性。另外,染料本身可以結(jié)合到其他物質(zhì)。或者,該蛋白質(zhì)的溶解性可能會顯著降低時,用熒光染料標(biāo)記。的抗原與抗體的特異結(jié)合也可造成負面影響,這會導(dǎo)致相對的未標(biāo)記的抗體的標(biāo)記抗體的親和力降低。在這些非特異效應(yīng)的染料也可以導(dǎo)致增加的結(jié)合的抗體,以測試的塑料表面,如ELISA板,結(jié)合到樣品中的內(nèi)源性蛋白,或結(jié)合到捕獲抗體。在這些情況下,會發(fā)生假陽性的測量的被分析物在沒有或整個試驗將遭受高背景。與蛋白質(zhì)陣列,單點增加的背景熒光觀察。該signal-to-noise比劣化。例如,大多數(shù)熒光染料標(biāo)記是疏水的,因此可以改變綁定特性的抗??體。進一步,染料本身可以綁定到其他物質(zhì)或者,蛋白質(zhì)的溶解度可明顯降低當(dāng)貼上了熒光染料。在這些情況下,假陽性測量在沒有發(fā)生的分析物,或整個試驗將遭受高背景。與蛋白質(zhì)陣列,增加背景熒光的單點是觀察。的信噪比惡化。
  同樣,蛋白質(zhì)或抗體結(jié)合的熒光染料,其中一些能夠減少,甚至關(guān)掉,熒光染料。所有的反應(yīng)發(fā)生在蛋白質(zhì)陣列是非常復(fù)雜的,因為同時使用多種捕獲和標(biāo)記的檢測抗體在一個反應(yīng)體積。因此,從樣品中的蛋白質(zhì)或標(biāo)記的抗體與單點的非特異性結(jié)合的可能性更大。涉及從樣品組件,影響抗體的干擾效果更常見的是在11蛋白質(zhì)陣列比傳統(tǒng)檢測。因此,蛋白質(zhì)的非特異性結(jié)合的概率從樣品或標(biāo)記的抗體與單點是更大的。干擾的影響涉及組件從樣本影響抗體更常見的蛋白質(zhì)陣列比傳統(tǒng)的化驗。 11
  交叉反應(yīng)或交叉反應(yīng)的抗體行使的??情況下,它能夠綁定目標(biāo)分析物以外的結(jié)構(gòu)。通常情況下,這些結(jié)構(gòu)顯示出極大的相似性的分析物。實施例。將代謝產(chǎn)物的分析物,具有類似的分子結(jié)構(gòu),和一個隨機的相似性或同源性的氨基酸序列的蛋白質(zhì)的化學(xué)物質(zhì)。交叉反應(yīng),或交叉與場合,當(dāng)抗體結(jié)合的能力結(jié)構(gòu)行使其他玩具目標(biāo)分析物。經(jīng)常,這些結(jié)構(gòu)顯示一個偉大的相似性的分析物。
  交叉反應(yīng)可以影響競爭力的分析,在一個非常戲劇性的方式,因為只有一個檢測抗體潛在的交叉反應(yīng)。4,6調(diào)查的一部分,大多數(shù)試驗驗證,包括驗證完成時,根據(jù)FDA的指導(dǎo)原則是推薦12
  交叉反應(yīng),能起到顯著的作用,蛋白質(zhì)的檢測Western印跡和免疫組化應(yīng)用。這額外的頻段,在染色或細胞結(jié)構(gòu)變得明顯。在許多情況下,這些不需要的綁定的確切的分子的原因是未知的。在Western印跡法,其原因往往會簡單地是天然存在的被分析物蛋白質(zhì)的降解產(chǎn)物。降解也可以導(dǎo)致從有條不紊的方法。但是,在某些情況下,這個故事的降解是不是真正的,真實的原發(fā)性或繼發(fā)性的抗體的交叉反應(yīng),必須考慮到。
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