購(gòu)買時(shí)請(qǐng)注意選擇相應(yīng)的產(chǎn)品名稱
| 膜厚度和血紅蛋白結(jié)合位點(diǎn)的數(shù)量影響最小樣本 | |||
|---|---|---|---|
|
測(cè)試樣品可以毛細(xì)血,靜脈抽血的抗凝劑(通常EDTA),冷凍靜脈血畫(huà)在抗凝、和控制。 使用原型系統(tǒng),85μL第一緩沖和55μL第二緩沖足以執(zhí)行漂洗。 檢測(cè)時(shí)間是大約五分鐘。 在添加第一個(gè)緩沖區(qū)和閱讀濕帶空白,太長(zhǎng)時(shí)間的延遲增加血液可以讓太多的緩沖區(qū)傳遞,沖洗將不完整。 因此,血液樣本應(yīng)該添加在15秒的讀取濕帶反射。 時(shí)間的添加第二個(gè)緩沖區(qū)不是關(guān)鍵的檢測(cè)方法提供了許多優(yōu)點(diǎn),包括以下:
在離子綁定步驟的分析,不僅超額血紅蛋白是通過(guò)帶但也沖洗其他不具約束力的元素在血液樣本。 這就消除了可能的干擾物質(zhì)從測(cè)量前區(qū)反射率測(cè)量是由。
血紅蛋白綁定第一緩沖區(qū)將非糖化和糖化血紅蛋白數(shù)量比例濃度在示例。 因此,改變數(shù)量的血紅蛋白綁定第一緩沖區(qū)將導(dǎo)致一個(gè)比例變化在糖化血紅蛋白綁定與第二緩沖。 變化總血紅蛋白測(cè)量因此平行于糖化血紅蛋白的變化測(cè)量。 使用的比率來(lái)計(jì)算糖化血紅蛋白總量%糖化血紅蛋白變化的影響消除。 脫到帶變化由于組件和制造差異因此最小化。 這在圖2中可以看到,它顯示來(lái)自多個(gè)化驗(yàn)結(jié)果相同的樣本。 濃度的變化總血紅蛋白綁定在不同測(cè)定法是平行的濃度變化糖化血紅蛋白。 結(jié)果的精度提供了在圖2中說(shuō)明的不精確比率是一個(gè)很多小于將預(yù)測(cè)從總和糖化血紅蛋白測(cè)量不精確,如果這兩個(gè)都是完全獨(dú)立的。
兩個(gè)總和糖化血紅蛋白測(cè)定在同一位置的矩陣使用相同的光源和探測(cè)器。 兩次測(cè)量之間的差異最小化,從而提高分析精度。膜是由只有共價(jià)束縛,帶負(fù)電荷的羧基和boronate組和不包含任何不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)或標(biāo)記化合物。 膜本身是穩(wěn)定不制冷,這使得它非常適合發(fā)展中國(guó)家使用。膜是測(cè)定唯一的活性組分,可以合并到一個(gè)數(shù)量的設(shè)計(jì),可以是簡(jiǎn)單和廉價(jià)的,或更復(fù)雜的。
演示技術(shù)的可行性來(lái)衡量%糖化血紅蛋白,它被納入一個(gè)簡(jiǎn)單的試驗(yàn)系統(tǒng)。 檢測(cè)系統(tǒng)的組成包括緩沖區(qū)(pH值6.5),緩沖B(pH值9.5),測(cè)試帶,它存儲(chǔ)在一個(gè)干的
(硅膠)瓶,一個(gè)涂布方便添加樣品線的跨膜、手持系統(tǒng)的血糖計(jì)式反射計(jì)(名義430 nm領(lǐng)導(dǎo);見(jiàn)圖3)。測(cè)試條夾在表包含一個(gè)井被放置在結(jié)束時(shí)的膜帶插入。 緩沖區(qū)被添加到這個(gè)好,流進(jìn)膜。 測(cè)試條持有人還設(shè)計(jì)有插槽將兩條腿的涂布和正確定位線包含樣本到膜。
一個(gè)Porex橫向弗洛膜與添加boronate團(tuán)體準(zhǔn)備如上所述,用于測(cè)試條的設(shè)計(jì),利用橫向流性質(zhì)的膜(見(jiàn)圖4)。膜坐落在一個(gè)塑料支架,反光層謊言在閱讀區(qū),吸收劑的緩沖和沖洗水槽收集血液。 緩沖區(qū)被添加的一端膜通過(guò)油井計(jì),和血液樣品添加只是下游的緩沖區(qū)。 緩沖移動(dòng)樣品通過(guò)膜到水槽在另一端。 綁定發(fā)生在整個(gè)膜,反射測(cè)試所使用的應(yīng)用程序之間血液網(wǎng)站和水槽從一個(gè)洞里塑料支架。
組裝測(cè)試帶作為卡使用手冊(cè)紋理過(guò)程。 絲帶的不同組件被放置在塑料基板,這是預(yù)涂有粘合劑和預(yù)穿孔有破洞。 組件一起舉行使用層的雙貼膠帶。 每個(gè)卡片生產(chǎn)50測(cè)試帶,減少信用卡使用切紙機(jī)。 批次的5000測(cè)試帶的都是用這個(gè)過(guò)程。
在原型系統(tǒng)分析,計(jì)測(cè)量反射率的總血紅蛋白和糖化血紅蛋白如上所述。 這些反射測(cè)量轉(zhuǎn)換為血紅蛋白濃度,并計(jì)算出糖化血紅蛋白占總比率。 這個(gè)比率轉(zhuǎn)換為參考%糖化血紅蛋白值通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)化比率%的結(jié)果參考法糖化血紅蛋白。 參考方法用于研究下面描述的是一個(gè)boronate親和力的高效液相色譜法都有其%的糖化血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)化的糖尿病控制和并發(fā)癥試驗(yàn)(DCCT)。
反射率和濃度之間的關(guān)系是非線性的,是由實(shí)驗(yàn)決定的類型的膜被使用。 樣品用不同的血紅蛋白濃度是通過(guò)膜條件下沒(méi)有血紅蛋白結(jié)合。 反射率測(cè)量是為每個(gè)濃度的樣品流經(jīng)測(cè)量面積。 濃度與反射率數(shù)據(jù)都配有一個(gè)四參數(shù)邏輯方程。 這個(gè)方程將反射率測(cè)量在試驗(yàn)(如。 ,在點(diǎn)A和B在圖1)對(duì)應(yīng)的血紅蛋白濃度值。
糖化血紅蛋白濃度(B點(diǎn)測(cè)量)除以總血紅蛋白濃度(點(diǎn)測(cè)量)獲得糖化血紅蛋白,血紅蛋白總量比例。 這個(gè)比率是線性相關(guān)的糖化血紅蛋白濃度測(cè)定的參考方法(參見(jiàn)圖5)。圖5顯示了從多個(gè)分析獲得的數(shù)據(jù)的五個(gè)病人的血液樣本。 這種線性關(guān)系(斜率和截距)轉(zhuǎn)換比率來(lái)引用%糖化血紅蛋白值。
技術(shù)的性能進(jìn)行了研究使用原型系統(tǒng)。 這項(xiàng)研究包括比較分析結(jié)果參考方法,測(cè)量測(cè)定精度,確定測(cè)定線性,確定使用溫度應(yīng)力試驗(yàn)片的穩(wěn)定性。結(jié)果從化驗(yàn)血樣使用原型系統(tǒng)的分析比較結(jié)果相同的樣品使用NGSP二級(jí)參考方法。 提供了一種方法標(biāo)準(zhǔn)化NGSP糖化血紅蛋白檢測(cè)結(jié)果,建立了兩個(gè)研究糖化血紅蛋白濃度之間的關(guān)系和長(zhǎng)期問(wèn)題在糖尿病患者:DCCT和英國(guó)前瞻性糖尿病研究表明)。 NGSP集的標(biāo)準(zhǔn)比較測(cè)試結(jié)果從新技術(shù)參考方法測(cè)試結(jié)果,基于偏差之間的兩組結(jié)果。 測(cè)試方法是在滿足認(rèn)證標(biāo)準(zhǔn)。
凍全血樣品從四十患者獲得來(lái)自密蘇里大學(xué)的,一個(gè)主要的參考實(shí)驗(yàn)室NGSP。 這些樣本化驗(yàn)的boronate綁定高效液相色譜法,使用作為一個(gè)次要NGSP參考方法。 然后他們被重復(fù)使用中化驗(yàn)原型系統(tǒng)。 樣品的范圍從5%到11%的糖化血紅蛋白糖化血紅蛋白,與9之間5%和6%,七6%和7%之間,和二十四在7%和11%之間。
最小二乘法回歸分析的結(jié)果從化驗(yàn)使用原型系統(tǒng)與參考方法的結(jié)果給了一個(gè)回歸公式,Y = 1.21 X - 0.12,Y是原型糖化血紅蛋白和糖化血紅蛋白X是參考。 統(tǒng)計(jì)分析表明,邊坡是1(P = 0.394)和攔截是0(P = 0.397)。 相關(guān)系數(shù)R2為0.971,表明%糖化血紅蛋白結(jié)果使用原型試驗(yàn)證明一個(gè)好相關(guān)的結(jié)果使用的參考方法。 圖6顯示了偏壓情節(jié)原型之間的化驗(yàn)結(jié)果和參考方法測(cè)定結(jié)果。 95%的置信區(qū)間范圍的偏差結(jié)果落在2011 NGSP標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)證的可跟蹤性,研究結(jié)果表明DCCT。
原型系統(tǒng)的精度測(cè)量結(jié)果的多個(gè)化驗(yàn)的靜脈血樣本(儲(chǔ)存在4°C),它是由兩個(gè)運(yùn)營(yíng)商使用兩個(gè)很多帶了兩天。 每個(gè)操作員每天跑八化驗(yàn)對(duì)每個(gè)批次(32總化驗(yàn)對(duì)每個(gè)批次)。 總體結(jié)果一是意味著很多% 5.2的糖化血紅蛋白與3.1%的簡(jiǎn)歷。 結(jié)果兩人一個(gè)意味著很多5.4的糖化血紅蛋白與% 2.8%的簡(jiǎn)歷。 一個(gè)雙向方差分析的數(shù)據(jù)顯示沒(méi)有統(tǒng)計(jì)上顯著的日常變化(P = 0.238)或操作員算子變異(P = 0.238)。
線性度的測(cè)定是證明了結(jié)果的分析外加劑的正常和高架控制。 結(jié)果證明了分析有一個(gè)線性響應(yīng)到至少16%的糖化血紅蛋白和精度是一致的在線性范圍(見(jiàn)表)。
膜的穩(wěn)定性是決定通過(guò)將測(cè)試條雖然一個(gè)加速老化過(guò)程和存儲(chǔ)他們處于高溫45°c(早先的研究表明,離子的結(jié)合血紅蛋白的膜是影響膜的接觸到75%相對(duì)濕度持續(xù)一段時(shí)間。 測(cè)試條因此儲(chǔ)存在封閉瓶含有硅膠干燥劑)。 化驗(yàn)的靜脈血樣本,在aliquots冷凍貯藏進(jìn)行在不同存儲(chǔ)間隔和使用一個(gè)新瓶每個(gè)時(shí)間。 測(cè)試帶,被儲(chǔ)存在室溫下也用于測(cè)定血液在每個(gè)存儲(chǔ)間隔作為控制可能的變化隨著時(shí)間的血液樣本。 圖7提供了糖化血紅蛋白測(cè)定結(jié)果的百分比不同存儲(chǔ)間隔為兩套帶。
比一天零結(jié)果,分析結(jié)果證明沒(méi)有證據(jù)表明在45°測(cè)試條衰減測(cè)量糖化血紅蛋白C %至少365天。 測(cè)試條45°C提供存儲(chǔ)在相同的結(jié)果作為室溫存儲(chǔ)條在每個(gè)存儲(chǔ)間隔。 結(jié)果從這些化驗(yàn)還顯示,沒(méi)有腐爛在總血紅蛋白綁定或糖化血紅蛋白綁定在要么溫度為365天。 這證明了帶負(fù)電荷的團(tuán)體和boronate團(tuán)體保持它們的功能在兩個(gè)期間的溫度貯存時(shí)間。
初步結(jié)果表明,血紅蛋白測(cè)試可能的干擾物HbAE變體,廣告,交流,因?yàn)?膽紅素、脂血化驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有改變。 預(yù)計(jì)將會(huì)有小的干涉,因?yàn)榇蠖鄶?shù)洗血的成分通過(guò)閱讀區(qū)域進(jìn)行采樣測(cè)量之前。 化合物不僅必須綁定但也吸收光線的測(cè)量波長(zhǎng)為了干擾直接。 此外,任何降低綁定的總血紅蛋白會(huì)相應(yīng)減少并行降低糖化血紅蛋白由于使用的比率來(lái)計(jì)算%糖化血紅蛋白。
結(jié)論
使用所述綁定技術(shù),它有可能開(kāi)發(fā)出一種低成本的糖化血紅蛋白的檢測(cè)系統(tǒng)。 該系統(tǒng)可以利用手持反射儀測(cè)量。 的化學(xué)修飾膜是穩(wěn)定的,它允許系統(tǒng)有足夠的穩(wěn)定,不制冷。 因此,可以開(kāi)發(fā)一個(gè)相對(duì)低成本的系統(tǒng),可以用于在發(fā)展中國(guó)家。 這項(xiàng)技術(shù)也可以被納入更復(fù)雜的系統(tǒng),即時(shí)使用。
|
| 上一篇：開(kāi)發(fā)新技術(shù)執(zhí)行矩陣綁定和直接測(cè)量的總血紅蛋 | 下一篇：生物標(biāo)志物的發(fā)展納米技術(shù)為基礎(chǔ)的蛋白質(zhì)檢測(cè) |
|---|
無(wú)法在這個(gè)位置找到： xy/left.htm
首 頁(yè) |
中檢所對(duì)照品|
中檢所標(biāo)準(zhǔn)品|
化學(xué)對(duì)照品|
中藥對(duì)照品|
雜質(zhì)對(duì)照品|
對(duì)照品購(gòu)買|
新聞中心|
聯(lián)系我們|
網(wǎng)站地圖
2013-2019@ 河南尋夢(mèng)電子商務(wù)有限公司版權(quán)所有
豫ICP備17046142號(hào)-2