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| 氧化還原酶介導(dǎo)的測量 | |||
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ECD法利用氧化還原酶的標(biāo)簽。9,19氧化還原酶提供信號指示雜交也相媲美的光學(xué)方法（參見圖3）的擴(kuò)增。雖然這種方法已被用于微陣列，它已被用于比色法酶聯(lián)免疫分析（ELISA）年。氧化還原酶也被用在商業(yè)上成功的血糖儀。此ECD的方法是簡單的，商業(yè)上的成功，而且在技術(shù)上優(yōu)于上面討論的方法。該信號被放大，通過酶的作用，只有小的修改，傳統(tǒng)的基因表達(dá)的協(xié)議是必要的。
ECD輸出一個lambda秒殺實驗（0.375pM 0.75pM，下午1時05分，中午12時至下午3時，上午9時至下午6時，下午12時）從白血病細(xì)胞株的生物素標(biāo)記的cRNA成一個復(fù)雜的樣品。盒裝黃色區(qū)域應(yīng)結(jié)合各種拉姆達(dá)穗DNA的。所示的擴(kuò)展版本的lambda結(jié)合的領(lǐng)域之一。其他在芯片上的探針是互補的基因，這是在這個特定的細(xì)胞系的任何明示或不表達(dá)的特定集合。二十四個重復(fù)測定各濃度范圍內(nèi)的（一個范圍示出在展開的區(qū)域）。熒光和電子化數(shù)據(jù)有直接的關(guān)系目前正在進(jìn)行（點擊放大）。
COMBIMATRIX（華盛頓Mukilteo）正在開發(fā)的商業(yè)系統(tǒng)，是基于這ECD方法和基于半導(dǎo)體的微電極陣列。的COMBIMATRIX系統(tǒng)可以針對每個單獨的電極和測量的信號出現(xiàn)在該電極部位。一個芯片上的一節(jié)，每平方厘米有大約1000個電極（見圖4a）。一個新的12K版本的芯片每平方厘米有13,000電極（見圖4b）。在這兩種芯片，每個電極單獨尋址，可以在每個站點有獨特的低聚物合成。可以通過熒光或ECD方法雜交分析。
圖6。一個實際的ECD的原型，已開發(fā)（一）。計算機生成圖像的手持式發(fā)展（二）根據(jù)ECD的原型。系統(tǒng)采用微流控技術(shù)，以幫助移動樣品和探測器芯片解決方案（點擊放大）。
在COMBIMATRIX信號放大方法，所附的報告基團(tuán)通常是辣根過氧化物酶。在過氧化氫的存在下，氧化的酶底物向產(chǎn)物。作為回報，該產(chǎn)品是降低的適當(dāng)?shù)臈l件下，上面的電極。由于酶繼續(xù)創(chuàng)建產(chǎn)品以極快的速度，放大后的信號可以被檢測到的電流在電極。例如，為白血病細(xì)胞系中的基因表達(dá)實驗顯示ECD的輸出的λ尖峰對照組（參見圖5）。的數(shù)據(jù)生成從13K芯片，芯片的特定區(qū)域中合成的，其中給定lambda值捕獲探針。檢出限為0.375 PM生物素化的lambda的cRNA。二十四個重復(fù)為每個拉姆達(dá)濃度與給定的序列。
COMBIMATRIX制作原型，并正在開發(fā)一種更加緊湊，自動化ECD系統(tǒng)（見圖6a和6b）。許多反應(yīng)組分，或前體，可以被存儲在一個干燥的格式。長期穩(wěn)定性研究會進(jìn)行調(diào)查。
結(jié)論
這篇文章的目的是到現(xiàn)場全面檢討，而是提供新的檢測方法，有可能改變芯片的應(yīng)用，并催促他們使用的IVD市場的洞察。啟用ECD的優(yōu)點，有可能使微陣列無處不在的工具，不僅在研究和發(fā)展，而且臨床體外診斷試劑。
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